Compreender a diversidade proteómica a nível molecular é essencial para os avanços na biologia e na medicina, mas a sequenciação de proteínas na sua forma nativa completa continua a ser um desafio. Um estudo em Natureza por Motone et al. apresenta um método de sequenciamento de nanoporos que pode ler moléculas de proteína únicas e completas, permitindo a detecção de substituições de aminoácidos únicos e modificações pós-tradução (PTMs).
O método envolve um processo de duas etapas. Primeiro, uma proteína é carregada em um nanoporo formado pela lipoproteína bacteriana CsgC por força eletroforética, facilitada por um domínio de cauda carregado negativamente e pela adição de uma sequência ‘stopper’. Então, a desdobramento ClpX puxa-o de volta de forma constante em um trans-para-cis direção. Usando proteínas sintéticas, os autores mostram que seu método pode detectar substituições de aminoácidos únicos e mapear a atividade de quinases, identificando PTMs específicas do local, como a fosforilação.
